"Ако нашите първоначални резултати могат да бъдат възпроизведени от други лаборатории, те ще променят начина, по който в момента мислим за причините за болестта на Алцхаймер", казва д-р Рамон Трулас, преподавател във Висшия съвет за научни изследвания (CSIC ) в Института по биомедицински изследвания в Барселона и водещ автор на изследването. Според него това откритие може да позволи търсенето на по-ефективни лечения в предклиничната фаза.
Понастоящем единственият начин за точно диагностициране на заболяването е невропатологичният анализ след смъртта. Връзката между известните биомаркери със заболяването е неясна, така че е почти невъзможно да се диагностицират предклиничните етапи с реална сигурност.
Изследователите на CSIC показват в своята работа, че намаляването на съдържанието на митохондриална ДНК (mtDNA) в CSF може да бъде предклиничен показател за болестта на Алцхаймер; и от друга страна, че може да има пряка причинно-следствена връзка. Хипотезата е, че понижението в нивата на митохондриалната ДНК в CSF отразява намаляването на способността на митохондриите да захранват мозъчните неврони, което причинява тяхната смърт.
Намаляването на концентрацията на mtDNA предхожда появата на добре познати биохимични биомаркери на Алцхаймер (бета-амилоид 1-42, Т-тау и р-тау протеини), което предполага, че патофизиологичният процес на болестта на Алцхаймер Тя започва по-рано, отколкото се смяташе досега и че изчерпването му в mtDNA може да бъде един от първите предиктори на заболяването.
Освен че позволява изследване на възможната причинно-следствена връзка на mtDNA и прогресията на болестта на Алцхаймер, използването на mtDNA като индекс на предклинична болест на Алцхаймер осигурява важно предимство пред предишните биохимични маркери: откриването на този нов биомаркер на нуклеинова киселина Липсват техническите трудности, свързани с откриването на протеини. MtDNA може лесно да се определи количествено чрез количествена PCR в реално време (qPCR) или „Doplet Digital PCR“ (ddPCR).
Преди това проучване изследователите не са съобщавали, че свободни клетки, циркулиращи в mtDNA, могат да бъдат открити в човешкия CSF. Въпреки това, с това проучване, екипът на д-р Трул успя да определи количествено и възпроизведе mtDNA, използвайки qPCR, внимателно оптимизиран чрез спазване на указанията на MIQE.
Абсолютно количествено определяне на целевите молекули
За да валидират резултатите си с qPCR, учените използват QX100 Droplet Digital PCR система от Bio-Rad Laboratories. За разлика от qPCR анализите, QX100 системата осигурява абсолютно количествено определяне на ДНК целеви молекули без необходимост от стандартна крива. Важен фактор за анализа на CSF беше, че системата "Doplet Digital PCR" не изисква пречистване на пробата за отстраняване на PCR инхибитори, както е необходимо за qPCR анализи.
"Doplet Digital PCR" ни позволи да валидираме първоначалните измервания на qPCR, тъй като осигурява абсолютно количествено определяне на нивото на една молекула, без да разчитаме на стандартна крива ", обяснява Trullas. "С настъпването на технологията става все по-широко, ние очакваме, че ddPCR ще бъде бъдещето на митохондриалното откриване на ДНК в цереброспиналната течност", добавя той.
Д-р Трулас се надява, че други лаборатории и болници успешно ще възпроизведат резултатите от изследванията на неговата група, което ще потвърди, че намалените нива на mtDNA трябва да бъдат изследвани като възможна причина за болестта на Алцхаймер. Намирайки начин да блокира тази дегенерация, лекарите може да успеят да диагностицират и лекуват болестта на Алцхаймер, преди да се появят симптоми.
Източник: www.DiarioSalud.net
-zaburza-podno-porada-eksperta.jpg)
